从多方面分析柠檬酸发酵染菌的原因

正常的柠檬酸发酵培养基中,若除发酵菌株黑曲霉外还沾染了其他微生物,便称之为染菌。在生产过程中,引入杂菌的途径众多,涵盖人员操作、设备卫生、原辅料、环境卫生等方面。

 

操作染菌:操作人员需具备无菌意识,掌握基础的微生物学知识,能够熟练进行消毒与灭菌操作。柠檬酸发酵需进行各类灭菌操作,如定期对发酵罐进行空消,每罐培养基要进行实消。在这两个过程中,操作人员都必须严格依照灭菌的温度和压力进行操作。

 

种子罐染菌:柠檬酸发酵多为二级培养,原种需先经过种子罐扩培,而种子罐在培养过程中也极易遭受微生物污染。通常,种子罐在接入发酵罐前要进行杂菌检查,染菌的种子罐不可使用。

 

辅料带入杂菌:柠檬酸发酵过程中的主要辅料包括尿素、硫酸铵、泡敌、糖化酶等。一般来说,营养盐等辅料会在培养基实消前加入,如此在培养基实消时便可将辅料中的杂菌一并杀灭。由于柠檬酸发酵过程中培养基的特性及通风培养,发酵液容易起泡,严重时会出现漫罐的情况,尤其在黑曲霉生长的对数期,黑曲霉代谢旺盛,通常每隔几分钟就要添加一次消泡剂。消泡剂需在发酵培养过程中加入,所以若消泡剂及其相关管道灭菌不彻底,极易导致发酵染菌。

 

空气带入杂菌:柠檬酸为好氧发酵,发酵过程中需要持续通风,以确保发酵液中的溶氧能满足黑曲霉生长的需求。因此,压缩空气需经过过滤除菌后通入发酵罐,若过滤器安装使用不当或使用前灭菌不彻底,都会引发发酵染菌。

 

设备漏点与卫生:柠檬酸发酵过程会产生大量热量,发酵罐通常采用内置盘管,通过循环水来控制发酵温度。由于消罐会产生振动,在使用过程中,循环水的盘管焊缝会出现开焊或渗漏的情况,致使循环水进入发酵液,进而污染发酵液,造成发酵染菌。此外,柠檬酸发酵采用培养基实消,培养基中的蛋白质等有机物在受热条件下容易变性结垢,且发酵罐内的盘管、搅拌、检测探头等部件众多,结垢容易附着在这些部件上。倘若不能及时清理,结垢会滋生杂菌,且结垢包夹可能导致蒸汽加热灭菌不彻底,从而造成发酵染菌。

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