诊断试剂生产车间如何解决气溶胶污染问题?

当PCR出现假阳性的时候,我们常常会考虑是不是引物、试剂、Mix、模板、水等发生了污染,然后逐一排查,有时还是找不到原因,耗时耗力。

那么这些试剂和仪器到底为什么会被污染了呢? 其实有很大因素是核酸气溶胶污染。

 

1、核酸检测实验需注意核酸气溶胶污染

核酸检验人都知道在核酸检测实验室内样本的制备、扩增过程中都会产生各种污染,比如样本交叉污染、试剂仪器交叉污染、克隆质粒污染、PCR扩增产物污染、还有极容易忽视的气溶胶污染,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,在空气与液体面摩擦时,比如在核酸提取制备模板时,反复吹吸/混匀震荡反应液,以及PCR体系配液时充分震荡反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个非常重要而被忽视的污染源。

DNA/RNA气溶胶污染的问题,很严重,广泛分布在样本容器、实验室台面,试剂溶液中、仪器表面、内管附着等等,极其微量的气溶胶污染即可造成假阳性的结果,进而可能引起整个PCR实验室的污染,严重的甚至要关闭实验室,严重影响实验工作,甚至耽误疫情防控工作的开展。

 

2、实验室为何会出现气溶胶?

  • 在核酸检测实验过程中,高速运转离心时未盖紧试管盖;
  • 手工提取核酸时剧烈地摇动反应管;
  • 短时间处理大量的样本核酸提取实验;
  • PCR扩增完成后开盖;
  • 吸样时及移液器的反复吸样;
  • 处理血液样本时,标本暴漏在实验室空气中。

以上举例部分的这些行为都会使空气与液体表面摩擦,产生核酸气溶胶, 这些核酸小液滴还会落到实验台面、PCR仪、移液枪、吸头、盒子、检测人员衣服、头发、门把手等等地方,如果我们不注意,这些核酸气溶胶就会日积月累地积聚,这样做检测实验就特别出现问题比如PCR假阳性或者像报道中的造成检测人员的感染。大面积核酸气溶胶污染非常难以清除,若不采取清理与预防措施,污染会更加严重,长期释放污染核酸,终会不仅导致实验室停工也会导致检测人员的健康问题,所以对于核酸气溶胶污染一定要给予重视。

 

3如何解决气溶胶污染?

诺沃赛德DNA污染去除液 是一种非碱性,没有腐蚀性,没有致癌影响的DNA污染去除溶液。它可以使用在实验室的所有地方。据最新的一项测试表明,传统商业化的DNA去除剂往往含有有潜在腐蚀性危险的化学成分,包含叠氮化合物、矿物质酸如磷酸、盐酸、刺激性强的过氧乙酸,碱性物质如氢氧化钠等。润联旗下的诺沃赛德DNA污染去除液则表现完美,没有对金属板产生任何损伤。对实验室其他类型的仪器表面也进行了腐蚀性检测,不会对塑料、橡胶等仪器的表面产生任何损伤。

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