噬菌体爆发前的三联征:值班员十分钟就能判断
噬菌体污染和普通染菌在发酵参数上的表现完全不一样。有经验的值班员看三个信号,十分钟内就能初步定性,不用等实验室报告。
第一,溶氧突然大幅回升。菌体被噬菌体成片裂解,耗氧骤停,溶氧值会从正常水平蹿到百分之一百三十以上,这是噬菌体最典型的信号。
第二,光密度停止增长甚至骤降,镜检看到的不是完整的杂菌细胞,而是大量菌体碎片。
第三,酸碱度异常波动,发酵液由浑浊变清,耗糖几乎停滞。
三个信号同时出现,行内叫作三联征,直接按噬菌体红色警报处理。因为噬菌体的一个裂解周期只有几十分钟,等平板结果出来,一罐料早就没了。
确认靠双层平板法。下层铺含宿主菌的固体培养基,上层用半固体软琼脂混匀待测样,待测样要经过零点二二微米过滤的上清液,培养过夜后看有没有透明噬菌斑。一个噬菌斑理论上对应一个噬菌体颗粒,可以定量到每毫升多少个噬菌体形成单位。车间空气也能测,平板开盖暴露三十分钟再培养,就能知道环境里有没有噬菌体本底。
溯源时还有一个方向容易被忽略,就是溶源性噬菌体。有些生产菌株本身基因组里就整合着噬菌体,平时相安无事,遇到温度、酸碱度或营养应激就会自身裂解。新菌种上罐就出事、同批多罐同时出事的,先查这条线。
噬菌体在环境里存活能力强,处理时车间地面、器具、下水道都要覆盖,种子间和大环境的空间消毒是防线的第一层。
看见三联征再行动是止损,监测本底做在前面才是防治。

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